食源性寄生虫病的诊断技术

二、食源性寄生虫病的诊断技术

食源性寄生虫病的诊断包括临床诊断、流行病学诊断和实验室诊断3个方面。临床诊断主要依据感染食源性寄生虫后出现不同的发病症状或体征，流行病学诊断主要掌握相关的流行病学资料，而实验室检验结果是正确诊断寄生虫病的主要依据。

寄生虫病的实验室检验主要包括病原学检验、免疫学检验及分子生物学检验等3个方面。病原学检验是确诊的依据，免疫学和分子生物学检验则通常是在难以从送检标本中找到寄生虫病原体，或者是在需要进行早期诊断以及开展寄生虫病普查工作时采用的重要手段。

熟悉或掌握寄生虫学基本知识、基本理论和基本技能是做好寄生虫病检验工作的前提。寄生虫病检验的主要步骤是：①采集适合的标本送检；②采用适合的方法检验；③对检验结果进行鉴定或分析，报告力求正确。对于寄生虫病检验来说，熟悉或掌握寄生虫的形态和生活史尤为重要，检验者可据此确定采集什么样的标本，如何采集标本，何时采集标本以及怎样检验标本等。如肠道寄生虫及血吸虫、华支睾吸虫和卫氏并殖吸虫等寄生虫的虫卵一般均可从粪便标本中检获，后者还可从痰内检出；蛲虫的孕卵雌虫通常于夜间爬出肛门外排卵，故可在患者会阴部检获虫卵或成虫；血内微丝蚴具有夜现周期性的特性，故通常在晚上9时后取外周血进行检查。此外，对于大多数寄生虫病均可取患者血清进行免疫学或分子生物学检验。但值得注意的是，在某些寄生虫病（如肺孢子虫病）患者血清中，不仅很难检测到循环抗体，而且也很难检测到循环抗原或DNA片段。

1．病原学检验

运用适当技术从患者送检标本中检查寄生虫病原体是诊断寄生虫病的最可靠的方法。有的病原体（如蛔虫成虫）用肉眼检查就可辨认清楚；而有的病原体（如虫卵和原虫）则必须在显微镜下才能识别。通过病原学检验，不仅可鉴别寄生虫的虫卵、成虫及原虫的滋养体或包囊等，还可检获特定发育阶段的幼虫。提供检查的标本种类很多，包括粪便、血液、骨髓、组织、各种排泄物、分泌物及其他体液等。因此，用于检查的具体方法应根据标本种类、寄生虫虫种及其虫期和具体感染情况而定，原则上应首先选用最简便、最有效和最可靠的方法进行检查，必要时还可取材作人工培养、动物接种、活组织检查及感染度测定等。有时，需同时采用多种方法作定性和定量检查。

2．免疫学检验

免疫学检验主要作为寄生虫病检验的辅助手段。由于免疫学理论和技术的飞速发展，免疫学检验技术在寄生虫病诊断与防治中的应用日趋广泛。它的优点在于可对早期、轻度和深部的寄生虫感染以及雄虫单性寄生病例作出诊断；慢性或晚期病例很难查到病原体，免疫学检验的结果可作为重要参考依据。免疫学检验还是进行流行病学调查、筛选病原学检验对象以及考核防治效果和进行疫情监测的重要手段。免疫学检验最常用的样本是受检者的血清，检验者可检测血清中特异性抗体、循环抗原或免疫复合物。若血清中存在循环抗原，则往往提示为近期感染或活动性感染。理想的免疫学检验方法的标准应是敏感、特异、快速、微量、经济、简便、无毒性，能反映虫荷，区别既往或近期（活动）感染，并具有疗效考核价值等。

3．分子生物学检验

DNA探针和PCR技术是近些年迅速发展起来的新技术。目前已被广泛用于许多原虫和部分蠕虫的检测或鉴定，具有十分广阔的应用前景。DNA探针技术应用较多的为斑点杂交和原位杂交法。PCR技术应用较多的为套式PCR和PCR-ELISA。

此外，寄生虫蛋白质等电聚焦和聚丙烯酰胺凝胶电泳、同工酶电泳技术等在寄生虫的种株鉴定中也十分有用，因此，亦常被用于寄生虫病的实验诊断及寄生虫的分类研究。