椰毒假单胞菌酵米面亚种

十四、椰毒假单胞菌酵米面亚种

椰毒假单胞菌酵米面亚种（pseudomonas cocovenenans subsp．farinofermen-tans，PCF）为革兰阴性杆菌，PCF到目前发现5个血清型（O-Ⅲ，O-Ⅳ，O-Ⅴ，O-Ⅵ，O-Ⅶ）。已知血清型O-Ⅴ，O-Ⅵ，O-Ⅲ产毒。其毒性是O-Ⅴ＞O-Ⅵ＞O-Ⅲ。PCF是我国发现的急性食源性疾病的病原菌，主要由该菌产生的外毒素（米酵菌酸，bongkrekie acid）所致。国内辽宁、吉林、黑龙江等省报道较多，在广西、云南、四川、河北及内蒙等地也有报道。该菌引起的食源性疾病，发病急，发展迅速，病情复杂，至今尚无特效的治疗方法。发病与饮食方式及饮食习惯有很大的关系，四季均可发生，其中臭米面中毒多见于6～9月，银耳中毒多见于6，7和11月。

1．常规分离鉴定技术

（1）检查材料：患者呕吐物、剩余食品、可疑食物等。

（2）培养分离

1）直接分离培养：将检样直接分离在PDA琼脂平板经36℃培养18～24小时，挑取灰白色、圆形、光滑、湿润、有光泽、大小为1～2mm的菌落进行涂片染色镜检，如菌体形态符合该菌特征时，即做纯培养作进一步的生化试验鉴定菌株（见GB／T4789．29-2003）。

2）增菌培养：以无菌操作取检样按1∶10之比接种于1％葡萄糖肉汤中，置36℃培养18～24小时后再分离在PDA琼脂平板，以后步骤同直接分离。

（3）产毒试验和米酵菌酸测定：见GB／T4789．29-2003。

2．流行病学调查分型技术（血清学分型）

（1）O抗原的制备：将分离获得的纯菌接种于PDA琼脂斜面上置36±1℃培养24小时，然后用无菌生理盐水将培养物洗下，加热煮沸2小时，再用无菌生理盐水将此菌液进行稀释至5亿～10亿／ml的菌悬液，即为凝集试验用的抗原。

（2）O抗原的鉴定：抗原先与多价血清做玻片凝集试验，凝集者再依次与O-Ⅲ，O-Ⅳ，O-Ⅴ，O-Ⅵ，O-Ⅶ，O-Ⅷ因子血清做试管定量凝集试验，根据试验结果判定O抗原。

注意：需同时用盐水作对照，不自凝者才能进行O抗原的定型。