病毒性肝炎的血清学检测

一、病毒性肝炎的血清学检测

肝炎病毒种类多，各种肝炎病毒的基因构型和抗原构造各不相同，刺激机体所产生的抗体也各异，因此各自具有特异的血清标志物。临床上主要运用ELISA、RIA、CLIA等技术检测肝炎病毒的血清标志物，为临床诊断、治疗及流行病学调查提供依据。

1.甲型病毒性肝炎的血清学检测　甲型病毒性肝炎由甲型肝炎病毒（HAV）引起。HAV只有一个血清型，特异性血清学指标是抗-HAV-IgM和抗-HAV-IgG。人感染HAV后，血液中首先出现抗-HAV-IgM，2～3周达高峰，1～2个月其含量后迅速下降，3个月后基本消失。因此抗-HAV-IgM可以作为早期诊断甲型病毒性肝炎的指标。抗-HAV-IgG一般在急性感染后第3～12周出现，滴度缓慢上升，至6个月后达高峰，然后逐渐下降，维持时间较长，可终生存在。因此抗-HAV-IgG可作为人群HAV既往感染的一个指标。临床通常采用ELISA、CLIA对抗-HAV-IgM和抗-HAV-IgG进行检测。

2.乙型病毒性肝炎的血清学检测　乙型肝炎病毒（HBV）抗原复杂，主要包括乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎核心抗原（HBcAg）和乙型肝炎e抗原（HBeAg），每种抗原均可刺激免疫系统产生其特异性抗体。目前检测到的HBV特异血清标志物主要有HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc-IgM和抗-HBc-IgG，常用的检测方法为ELISA法、金标记免疫层析技术和CLIA等。

（1）HBsAg　为乙型肝炎患者血清中首先出现的病毒标志物，在急性乙型肝炎潜伏期可出现阳性，先于临床症状及肝功能异常出现时间1～7周，故用于早期诊断和普查。HBsAg与其他标志物联合检测可诊断HBsAg携带者、急性乙型肝炎潜伏期、急性和慢性肝炎患者以及与HBV有关的肝硬化和肝癌。HBsAg阴性不能完全排除乙型肝炎。

（2）抗-HBs　是一种保护性抗体，是机体感染HBV或接种乙肝疫苗的标志。绝大多数自愈性HBV感染者仅在血中HBsAg消失后能检测到抗-HBs，其间隔时间可长达数月；再次感染HBV后，2周内出现抗-HBs，且效价较高，在体内可持续多年。HBsAg消失的同时伴抗-HBs的出现，是临床上慢性乙型肝炎治疗的最终目标。HBV疫苗接种者血中能否检测出抗-HBs，是衡量预防接种效果的主要指标。

（3）HBeAg　是HBV在体内复制和机体具有传染性的重要标志，也是HBV急性感染早期的标志。HBeAg的出现稍晚于HBsAg而消失早于HBsAg，它与HBV DNA呈正相关。当乙型肝炎急性期时，血清中HBeAg消失表示预后良好，若HBeAg持续阳性提示HBV在体内持续复制，肝病易反复活动，预后差。

（4）抗-HBe　抗-HBe在HBeAg即将消失或消失后出现。一般认为HBeAg阳性转为抗-HBe阳性，提示病毒颗粒正在被清除，病毒复制减少，传染性减弱，是预后好的象征。但另一方面，部分抗-HBe阳性的患者，特别是慢性患者其HBV DNA仍在复制，使病情加重。临床上很少有HBeAg及抗-HBe共存。

（5）HBcAg　能反映血清中Dane颗粒的存在及肝内HBV的复制，是乙肝病毒存在的直接标志，与HBV复制呈正相关，可反映HBV的活动性及复制程度。但血清中不存在游离的HBcAg，要先将血清中的Dane颗粒分离出来，然后进行检测，故临床检测较为困难，一般不作为常规检测项目。

（6）抗-HBc-IgM　是HBV感染机体后早期出现的抗体，是HBV复制和具有传染性的标志，也是诊断急性乙肝的重要血清学标志，特别是在HBsAg阴性的急性乙肝中更具有特殊的意义。急性乙肝时，抗-HBc-IgM呈高滴度；慢性HBV携带者，低度或中度抗-HBc-IgM的存在提示HBcAg被合成，有病毒活动。约50％的慢性乙肝患者为抗-HBc-IgM阳性，而健康HBV携带者很少阳性。若急性乙肝患者病情好转痊愈，则抗-HBc-IgM随同HBsAg和ALT逐渐下降而转阴，若抗-HBc-IgM持续不降，提示有转化为慢性乙肝的可能。

（7）抗-HBc-总抗体　是HBV感染的标志。其滴度高，容易检出，其他指标转阴后，抗-HBc仍可为阳性，可维持多年甚至终生携带，因此是流行病学调查的良好标志。在流行区，约20％的人群可出现单独抗-HBc阳性。高滴度抗-HBc提示病毒复制，低滴度时表示既往感染。

在HBV感染的不同时期及机体免疫功能的不同状态，患者血清中乙型肝炎病毒抗原、抗体会发生相应的动态变化，具有不同的临床意义，见表10-2。

（8）Pre-s1及抗-PreS1、Pre-s2及抗Pre-s2　Pre-S1和（或）Pre-S2阳性提示HBV复制活跃，具有较强的传染性。抗-PreS1是HBV的中和抗体，能阻止HBV侵入肝细胞，其出现于急性期和恢复期，表明预后良好。

3.丙型病毒性肝炎的血清学检测　丙型病毒性肝炎由丙型肝炎病毒（HCV）引起。HCV感染的特异性血清学标志是抗-HCV抗体，即抗-HCV-IgG和抗-HCV-IgM。目前建立的抗-HCV检测方法多为抗-HCV-IgG检测，最常用的技术为ELISA，广泛用于献血人员HCV感染筛查和临床实验室检测。抗HCV检测阳性提示既往感染HCV；多数病人抗-HCV阳性伴有HCV RNA的存在。

表10-2　HBV感染血清标志物检测结果及临床意义

4.戊型病毒性肝炎的血清学检测　戊型病毒性肝炎由戊型肝炎病毒（HEV）引起。抗-HEV抗体是检测戊型肝炎的主要指标，常规方法是用ELISA测定抗-HEV-IgG。该抗体在戊型肝炎急性期即可检出，滴度较高可持续约6个月甚至更长时间。一般认为，戊型肝炎急性期第一份血清抗-HEV滴度＞40，以后逐渐下降，或抗-HEV先阴后阳，或抗-HEV滴度逐步增高，均可诊断为急性HEV感染。