其他检测方法

三、其他检测方法

（一）血清免疫球蛋白的分类鉴定

1.免疫电泳　免疫球蛋白病的患者，经血清蛋白区带电泳和免疫球蛋白测定，已基本证实是否有免疫球蛋白的异常增高和其含量的多少，但是增高的M蛋白究竟是哪一类免疫球蛋白，仍需进一步分类鉴定。

血清标本经区带电泳将各种蛋白成分分成区带，继而用各种特异性抗血清进行免疫扩散，根据M蛋白在免疫电泳中所形成的特殊沉淀弧，观察其电泳迁移位置与抗原特异性，可鉴定M蛋白的免疫球蛋白类型和其轻链型。一般多用抗IgG、IgM、IgA、κ和λ轻链等抗血清进行实验，用抗正常人血清作为对照。正常血清与上述抗体反应出现的沉淀线为均匀的弧形，而M蛋白与相应抗体发生反应所出现的沉淀弧比较特殊，较普通沉淀弧宽，凸出呈弓形或船形（图15-2）。

图15-2　IgAλ型骨髓瘤的免疫电泳图谱

1.孔中为血清标本，槽中为抗血清，箭头所指为骨髓瘤蛋白a.正常人血清b.抗IgG血清c.抗IgA血清d.抗IgM血清e.抗κ血清f.抗λ血清

2.免疫固定电泳　该方法类似免疫电泳，将待测血清或其他标本在琼脂平板上作区带电泳，分离后于其上覆盖含抗κ或λ轻链或各类重链的抗血清滤纸。当抗体与某区带中的单克隆免疫球蛋白结合后，便形成复合物而沉淀下来，再通过漂洗与染色，呈现浓而狭窄的着色区带，即可判断单克隆丙种球蛋白的轻链和重链型别（图15-3）。

图15-3　免疫固定电泳图谱示例（IgA-λ型M蛋白）

κ、λ、G、A、M分别代表覆盖含抗κ、抗λ、抗IgG、抗IgA和抗IgM的抗血清；箭头所指为加样处

（二）本周蛋白的检测

本周蛋白在pH值5.0的条件下，加热至50～60℃时出现沉淀，继续加热至90℃后又重新溶解。这种加热沉淀法简便易行，但敏感度较低，也不能确定轻链的型别。要确定轻链的型别可用抗κ和λ型轻链抗血清进行免疫电泳分析或免疫固定电泳。

免疫球蛋白异常增生病的检测手段较多，一般应采用两种以上的检测方法相互印证。对可疑临床表现者，一般先进行区带电泳分析、免疫球蛋白定量检测或尿本周蛋白定性检测作为粗筛实验。阳性者再作免疫电泳或免疫固定电泳、免疫球蛋白亚型鉴定、血清及尿中轻链定量及比值计算等作为确证实验。良性免疫球蛋白增生者其轻链含量随增高的免疫球蛋白一同增高，比值无明显异常；而恶性增生者轻链与重链比值不是1∶1，其比值会发生明显改变。

思考题

联系临床检验基础、血液学检验等知识，明确多发性骨髓瘤的诊断步骤。

（宋兴丽）