淋病奈瑟氏菌核酸阳性

二、淋病奈瑟菌

(一)临床意义

淋病奈瑟菌又称淋病双球菌或淋球菌，是人类淋病的病原体。其致病物质主要包括菌毛、外膜蛋白、脂多糖、IgA1蛋白酶等。淋病奈瑟菌是常见的性传播疾病淋病的病原菌，人类是其唯一宿主，主要通过性接触、直接感染泌尿生殖道、口咽部和肛门直肠的黏膜，引起单纯淋病、盆腔炎、口咽部及肛门直肠淋病;或在分娩时通过产道感染新生儿导致淋菌性结膜炎，又称新生儿脓漏眼;此外也可通过毛巾、浴池间接感染，引起幼女的阴道口阴道炎。播散性淋病常见于补体成分缺陷患者。

(二)生物学性状

1．形态与染色　革兰阳性双球菌，直径0．6～0．8μm，呈肾形或咖啡豆形，凹面相对。在脓性分泌物标本中，多位于中性白细胞内，而在慢性淋病常位于中性粒细胞外(彩图26)。无芽胞，无鞭毛，有菌毛，新分离的菌株有荚膜。

2．培养特性　　本菌为需氧菌，初次分离时需供给5%～10% CO₂。营养要求较高，只能在含血清、血液或多种氨基酸的培养基上才能生长。最适温度为35℃，最适pH值7．5。目前常用的培养基有巧克力色血平板和淋病奈瑟菌的选择性培养基，如含万古霉素、多粘菌素和制霉菌素的Thayer－Martin(TM)培养基、改良的Thayer－Martin(MTM)培养基、Martin－Lewis(ML)培养基和纽约市(NYC)培养基。在巧克力色血平板上，经24～48 h培养，形成灰白色、圆形、凸起、光滑、湿润、边缘整齐、直径约0．5～1 mm的半透明菌落，易乳化，有粘性。本菌也可产生自溶酶。

3．生化反应　氧化酶、触酶试验均阳性。只分解葡萄糖，产酸不产气，不分解其他糖类。

4．抗原结构　淋病奈瑟菌抗原构造复杂，主要有菌毛抗原、外膜蛋白抗原和脂多糖抗原。

5．抵抗力　对外界抵抗力弱，对寒冷、干燥和化学消毒剂敏感。干燥状态下1 h或55℃5 min即可死亡，1∶4 000硝酸银经2 min即可杀死。本菌能迅速自溶。

(三)微生物学检验

1．标本采集　根据临床症状和体征不同，采集泌尿生殖道脓性分泌物、眼结膜分泌物等标本。用无菌棉拭伸入阴道后穹窿或宫颈内1．5 cm处，稍转动并停留10～30 s，蘸取阴道和宫颈脓性分泌物;男性有临床症状患者可直接蘸取尿道分泌物，无临床症状或疗效观察者，用男性采样拭子插入尿道3～4 cm，轻轻转动并保留10～15 s后取出;新生儿结膜炎时应采取眼结膜表面分泌物。

2．检验方法　与鉴定

(1)涂片染色与镜检:将棉拭子在载玻片上轻轻滚动涂片，革兰染色后若在中性粒细胞内发现革兰阴性双球菌，可初步报告为:“中性粒细胞内找到革兰阴性双球菌”。男性淋菌性尿道炎患者的标本，敏感性及特异性高达95%，可作初步诊断。女性阴道有许多正常菌群寄居，故对涂片所见的结果必须由培养结果得以证实方可报告。新生儿结膜分泌物如见胞内、胞外大量革兰阴性双球菌可初步诊断为淋球菌性结膜炎。

(2)分离培养:细菌培养是世界卫生组织推荐的诊断淋病的“金标准”。标本采集后应立即接种预温的巧克力色血液琼脂或选择培养基，立即置于5% CO₂环境下35～36℃培养36～48 h。培养48 h后仍无淋病奈瑟菌特征菌落生长可报告“无淋病奈瑟菌生长”。

(3)鉴定:氧化酶试验和触酶试验阳性，葡萄糖发酵试验阳性，其他糖类阴性者可确定为淋病奈瑟菌。发酵葡萄糖而不发酵麦芽糖与蔗糖，以及30% H₂O₂试验阳性可与脑膜炎奈瑟菌等相鉴别。淋病双球菌与其他常见革兰阴性球菌鉴别见8－13。

(4)鉴定依据:涂片染色为革兰阴性双球菌;细菌培养呈透明似水滴状、无色素易乳化的小菌落;氧化酶试验和触酶试验(30% H₂O₂)阳性;发酵葡萄糖、不分解其他糖类。

案例讨论2

某一脓汁标本，涂片革兰染色镜检:革兰阳性球菌，直径1μm左右，呈单个、成对或短链排列;血琼脂平板分离培养:菌落表面光滑湿润，圆形，边缘整齐，黄色，凸起，直径1～1．5 mm，菌落周围有完全透明的溶血环，菌落涂片革兰染色镜检;革兰阳性球菌，呈单个、双、短链和葡萄串状排列，以葡萄串状排列为主;生化反应:触酶阳性，血浆凝固酶(试管法)阳性，发酵葡萄糖产酸，发酵甘露醇产酸，对新生霉素敏感。

讨论:检出何种细菌?鉴定依据是什么?该病原菌有何临床意义?

案例讨论3

疑是败血症患者，血液标本增菌培养48 h后，培养液底层出现沉淀生长现象，并有自下而上的溶血。将增菌液转种于血琼脂平板，经35℃18～24 h培养形成圆形、凸起、光滑、湿润、灰白色半透明小菌落，菌落周围有宽大透明的溶血环。该菌落经直接涂片，革兰染色镜检可见革兰阳性球菌，呈链状排列。

讨论:该菌可能是什么菌?如何进行进一步的检验和鉴定?该病原菌有何临床意义?

(赵秀梅　王桂芬)　　

思考题

1．简述化脓性球菌的种类?各有何临床意义?

2．解释:SPA、凝固酶试验、触酶试验、C反应性蛋白。

3．简述葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属、奈瑟菌属的主要生物学特性。

4．某发热患者，疑似金黄色葡萄球菌败血症，应如何进行微生物学常规检验?

5．如何进行临床常见3种葡萄球菌的鉴定?

6．如何鉴别肺炎链球菌和甲型链球菌?

7．简述抗“O”试验的原理　及意义。

8．怎样进行淋病奈瑟菌的常规检验?

9．归纳致病性葡萄球菌、链球菌(A、B、C、D群)、肠球菌、脑膜炎和淋病奈瑟菌的鉴定依据。