尿标本的细菌检验

二、尿标本的细菌检验

(一)标本采集、运送

1．采集方法　根据需要采用中段尿采集法、直接导尿采集法、膀胱穿刺法及留置导尿管24 h尿收集法等。最常用的尿液标本收集方法　是留取早晨清洁中段尿标本。收集步骤是首先用肥皂水清洗会阴部及尿道口，再用清水冲洗，排弃前段尿液，收集中段尿10～20 mL，直接排入专用的无菌容器，加盖立即送检。

2．标本运送与保存　尿液标本采集后应立即送检、及时接种，否则尿液细菌迅速繁殖，使尿中细菌计数不准确。不能立即送检的标本室温保存时间不能超过2 h，4℃冷藏保存时间不能超过8 h。疑为淋病奈瑟菌感染患者的标本不能冷藏保存。

(二)细菌学检验

1．检验流程:尿液标本细菌学检验流程见图18－3。

图18－3　尿液标本细菌学检验流程

2．涂片镜检　取尿液标本5～10mL放于无菌试管中，应以3 000 r/min离心30min，取沉淀物涂片，革兰染色镜检。对疑为念珠菌感染者，取沉淀物直接用高倍镜观察;也可制成薄片革兰染色，用油镜观察。疑为结核分枝杆菌感染时，尿液标本经4 000 r/min离心30 min，取沉淀物涂片进行抗酸染色镜检。根据染色性及形态特征向临床医生发初步报告。

3．尿液细菌计数　通常取患者中段尿作定量培养，常用的方法　是定量接种环法:用定量加样器取患者中段尿尿液5μL，滴加于血琼脂平板上或直接用定量接种环取尿液，在血平板上作连续划线接种，然后置35℃培养18～24 h后计数菌落，再计算出每毫升尿液中的细菌数。

4．分离培养与鉴定　根据检验目的不同，选择不同的方法　进行微生物分离培养。

(1)一般细菌培养:取尿液标本离心沉淀物接种于血平板和麦康凯平板35℃培养18～24 h，根据菌落特征、涂片染色结果及生化反应等进行鉴定，同时作抗菌药物敏感试验。

(2)淋病奈瑟菌:疑为淋病奈瑟菌感染时，标本接种于巧克力色平板，置35℃含5%～10% CO₂环境中培养24～48 h，根据菌落特征、涂片染色结果及生化反应等进行鉴定。

(3)真菌:疑为真菌感染时，标本接种于沙保弱培养基进行分离培养，按照真菌检验方法　进行鉴定。

(4)厌氧菌:疑为厌氧菌感染时，必须采集膀胱穿刺尿液接种于厌氧培养基，按照厌氧菌检验方法　进行鉴定。

(5)结核分枝杆菌:疑为结核分枝杆菌感染时，用米氏7H－10培养基或罗－琴氏培养基分离培养，按照结核分枝杆菌检验方法　进行鉴定。

5．结果报告

(1)尿沉淀涂片镜检结果:普通细菌根据形态及染色性，报告“找到革兰×性××细菌”。如见到革兰阴性双球菌、肾形、存在于细胞内(外)，报告“找到革兰阴性双球菌，存在于细胞内(外)，形似淋病奈瑟菌”，抗酸染色见到抗酸阳性杆菌，可报告“找到抗酸杆菌”，见到革兰阳性、卵圆形的芽生孢子和管状假菌丝，报告“找到酵母样细胞，形似白假丝酵母菌”。

(2)尿液细菌计数结果:革兰阴性杆菌大于10⁵ cfu/mL、革兰阳性球菌大于10⁴ cfu/mL时有诊断意义。分离培养后，立即进行微生物学鉴定及标准化的药敏试验，最后报告“检出××细菌”，并报告药敏试验结果。

(3)阴性结果:培养48 h仍无细菌生长者，报告“48 h培养无细菌生长”。

(三)尿液中常见的病原菌

泌尿系感染的细菌中80%为革兰阴性杆菌，其中以大肠埃希菌最为常见，占泌尿系感染的70%以上，其次为变形杆菌、铜绿假单胞菌、克雷伯菌、肠杆菌、沙雷菌等;20%为革兰阳性菌，其中以肠球菌多见，其次为葡萄球菌、粪链球。此外还有淋病奈瑟菌、结核分枝杆菌等。

(四)临床意义

泌尿系感染是指大量细菌在尿路生长繁殖而引起的尿路炎症。感染可累及肾盂、膀胱和尿道。泌尿系感染通常由尿道口上行感染所致，极少数为从体内其他感染病灶经血流或经淋巴管播散。临床症状主要有尿频、尿急、尿痛、排尿困难和腰痛。