五、脓液标本的细菌检验
(一)标本采集
对封闭性脓肿,先消毒患者局部病灶的皮肤、黏膜,再以无菌注射器抽取脓液放入无菌容器中送检;对开放性的脓肿一般以无菌棉拭子采取病灶深部的分泌物,瘘管以无菌方法 采取组织碎片,放入无菌试管中送检;对大面积烧伤的创面分泌物,可用无菌棉拭子采集多部位创面的脓液或分泌物,放入无菌容器送检,也可将沾有脓液的最内层敷料放入无菌平皿中送检。
(二)细菌学检验
1.检验流程脓液标本检验流程见图18-6。
图18-6 脓液、分泌物标本细菌学检验流程
2.涂片检查取标本涂片进行革兰染色镜检,根据形态和染色特点,报告“找到革兰×性××菌,呈×状排列”;疑似放线菌感染的脓液标本,可用接种环挑取含有硫磺样颗粒的标本置于洁净的玻片上,覆以盖玻片,轻轻挤压,用低倍镜及高倍镜检查并报告。
3.分离培养和报告
(1)普通细菌培养:将分泌物或脓液接种于血平板及伊红美蓝平板(或麦康凯平板)上,经37℃孵育18~24 h后,观察结果。如有细菌生长,根据菌落特征结合涂片染色结果,进一步鉴定细菌种属,可报告“检出××菌”。经37℃48 h培养后,仍未见细菌生长,可报告“48 h培养无细菌生长”。
(2)厌氧菌培养:将疑为厌氧菌感染的标本,接种血平板或厌氧血琼脂平板,置厌氧环境中经37℃培养24~48 h后,根据生长情况及涂片染色镜检结果,按厌氧菌生物学特征进行鉴定,报告“检出××菌”。若经3~5 d培养后仍未见生长,报告“厌氧培养×天无细菌生长”。
(3)炭疽芽胞杆菌培养:将疑为炭疽菌感染患部的脓液接种于血平板,对污染严重的标本,可先在肉汤培养基内增菌一夜后,经80℃20 min加热,杀灭非芽胞细菌,然后再移种血平板。经37℃培养18~24 h,挑取可疑菌落做涂片染色镜检,如见排列呈链状的革兰阳性竹节状大杆菌,悬滴检查无动力,可作出初步诊断。进一步做动物试验、串珠试验和噬菌体裂解等鉴定试验,报告“培养出炭疽芽胞杆菌×型”。
(三)脓液标本中常见病原菌
脓液标本常见的革兰阳性菌有金黄色葡萄球菌、A群链球菌、肺炎链球菌、肠球菌、炭疽芽胞杆菌、结核分枝杆菌、产气荚膜梭菌、破伤风梭菌、放线菌等;常见的革兰阴性菌有铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、流感嗜血杆菌、变形杆菌、类杆菌、梭杆菌等。
(四)临床意义
临床上由创伤、手术、侵入性器械操作等外科治疗引起的感染较为常见,感染以化脓性炎症为主。外伤性创伤感染中以葡萄球菌和链球菌引起的多见,放线菌、结核分枝杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌感染也较为常见,且易发生混合感染。深部创伤极易引起破伤风和气性坏疽等厌氧菌感染。烧伤创面最常见革兰阴性杆菌感染,如铜绿假单胞菌等,其次为革兰阳性球菌感染,可单独或混合感染。急性化脓性骨关节炎常由金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎链球菌感染所致;慢性化脓性骨关节炎、慢性骨髓炎常由结核分枝杆菌感染所致,葡萄球菌,链球菌染也常见。免疫功能下降或拔牙、口腔黏膜损伤时可出现放线菌所致的内源性感染,放线菌引起的皮下软组织化脓性炎症称为放线菌病。
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