真菌的其他鉴定方法

三、真菌的其他鉴定方法　

(一)生化检查

1．糖(醇)类发酵试验观察真菌对糖(醇)的发酵情况。

2．同化碳源试验含菌生理盐水与已融化的固体同化碳源培养基(45℃)混合，然后在培养基上分别加糖，置25℃孵育观察结果。若24 h后无变化可重复加糖。如能同化则在糖周围有生长圈，否则无生长。一般对双糖发酵的真菌能同化或利用糖类或碳源。主要用于酵母菌的鉴定。

3．同化氮源试验与同化碳源试验相同，但需用无氮源的培养基，不要加糖类，而加入硝酸钾。用于观察酵母菌对硝酸钾的利用情况。

4．明胶液化试验某些真菌可液化明胶。主要用于鉴别着色真菌、链丝菌、放线菌等。

5．尿素分解试验某些真菌如石膏样癣菌、新生隐球菌等可分解尿素。

(二)免疫学检查

真菌感染的诊断，主要取决于病原学诊断。但在某些情况不能获得病原学证据，如急性组织胞浆菌病、曲霉型支气管炎等，则需要依靠免疫学手段进行辅助诊断。与其它微生物相比，真菌产生的抗体慢而滴度低。免疫学方法　有皮肤试验和用胶乳凝集试验、酶联免疫试验、补体结合试验、荧光抗体试验、放射免疫试验测定血清中相应抗体的水平。

(三)其他鉴定实验

1．芽管形成试验　取少许待鉴定的白念珠菌接种于0．2 mL动物或人血清中，混匀，置37℃水浴或温箱2～3 h，涂片镜检观察有无芽管形成。有芽管形成的是白念珠菌，但并非所有的白念珠菌都能形成芽管。

2．厚膜孢子形成试验　将念珠菌接种于玉米粉聚山梨酯－80琼脂培养基进行小培养，25℃培养1～2 d后，显微镜观察厚膜孢子及假菌丝。白念珠菌能形成厚膜孢子。

3．病理组织检查　病理组织检查是诊断深部真菌病的重要方法　。真菌染色后在组织内发现孢子或菌丝则具有诊断意义。

4．动物接种　动物接种可以有效的分离病原性真菌，确定真菌的致病性。常用小白鼠接种新型隐球菌、孢子丝菌、皮炎芽生菌、组织胞浆菌较敏感。巴西芽生菌、球孢子菌应接种于豚鼠睾丸内。家兔对白念珠菌、皮肤丝状菌比较敏感。

5．核酸检测　应用分子生物学技术自临床标本中检测真菌DNA，如DNA探针杂交、PCR技术等正在不断研究和试验中。

6．真菌毒素的检测　检测真菌毒素的方法　有多种，如ELISA法、高效液相色谱法、薄层层析法等。ELISA法因操作简便并具有安全、快速、高效等优点，适用于大批量标本的检测，是检测食品的新方法　。

除上述技术外，目前一些新的快速的检测技术已经应用　。如使用自动化仪器和配套试剂检测体液中真菌1－3－β葡聚糖的实际含量，对真菌感染的早期诊断具有重要意义。