实验十八 红细胞渗透脆性试验
Erythrocyte osmotic fragility test
一、实验目的
掌握红细胞渗透脆性试验的原理、操作方法及临床意义。
二、实验原理
本实验检测红细胞在不同浓度低渗溶液中抵抗力的大小。在低渗盐水中,水分通过红细胞膜进入细胞内,达到一定程度时,红细胞发生肿胀、破裂、溶解。红细胞渗透脆性(抵抗力)与细胞的表面积和体积的比值及膜的厚度有关:比值越大,膜厚度越小,红细胞对低渗盐水的抵抗力越大,脆性越小;反之,则抵抗力越小,脆性越大。各种病因引起的球形及椭圆形红细胞与正常相比脆性加大。
三、实验器材
采血用具、试管、吸管、试管架、离心机等。
四、实验试剂
10g/L NaCl溶液、双蒸馏水。
五、实验方法
1.试管准备:取12支清洁干燥的试管编号并依次放置试管架上。
2.添加试剂:按表3‐1(编号)分别加入10g/L NaCl溶液和双蒸馏水,得到不同浓度NaCl溶液。
3.加入血液:静脉采血2ml,每管加入静脉血1滴,由低到高浓度颠倒混匀。
4.建立对照:按上述方法,另取12支试管,用正常人血作对照。
5.结果观察:室温静置2h后观察结果。
表3‐1 红细胞渗透脆性实验的操作
六、注意事项
1.每次均应做正常对照,被检血样与正常对照相差两管即0.4g/L才有意义。
2.氯化钠易潮解,临用前在37℃干燥24h。试剂必须现用现配,避免水分蒸发,改变离子浓度。
3.黄疸及重度贫血患者,结果常较难判断,可取肝素抗凝,离心去血浆,用生理盐水洗涤,配成50%的红细胞悬液再进行实验。
4.所有使用的器材必须清洁、干燥,避免引起溶血。
5.血液与NaCl比值为1∶25,血液必须直接注入试剂中,不可沿着管壁滴入,速度要慢。
6.以非抗凝血为佳。抗凝剂仅能使用肝素,其他抗凝剂会增加离子浓度,改变溶液渗透压。
七、结果判断
先从高浓度观察,根据各管中液体颜色和混浊度的不同判断。
开始溶血:上层液开始呈透明红色且管底有红细胞者。
完全溶血:溶液为透明红色且管底无红细胞者;必要时可离心后再观察结果。
八、结果报告
记录开始溶血管和完全溶血管NaCl溶液浓度。
九、参考范围
开始溶血管:4.2~4.6g/L。
完全溶血管:3.2~3.6g/L。
十、临床意义
1.脆性增加 见于遗传性球形红细胞增多症、口形红细胞增多症、椭圆形红细胞增多症(部分病例)、新生儿ABO溶血病、己糖激酶缺乏伴球形红细胞增多症、自身免疫溶血性贫血伴球形红细胞增多症等。
2.脆性降低 见于正常出生后几个月的婴儿、珠蛋白合成障碍性贫血综合征(称海洋性贫血)、血红蛋白病、缺铁性贫血(IDA)、阻塞性黄疸、肝炎、肝硬化、肝癌等。
(沈 颖)
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