肾穿刺标本的处理

第二节　肾穿刺标本的处理

一、理想的肾穿刺标本

理想的肾穿刺标本应该包括肾皮质、皮髓交界、少部分髓质，但应以皮质为主，同时还要保证有足够的肾小球数目，光镜标本至少要包含10个以上肾小球，否则其意义会大打折扣。肾穿刺时，要求病理医师或技术员在场，对所穿出的肾脏标本进行初步的现场处理，要在普通低倍光镜或解剖显微镜下粗略估计一下肾小球的大概数目，要保证有足够的肾小球，一般穿刺2条（见图3-2）。穿出的肾组织以＞12mm为宜（多数穿刺针的槽为20mm），但宁浅勿深（即半槽可能好于全槽）。肾小球在解剖显微镜下呈模糊的小红点，在低倍镜下为红色斑点状。放入固定液内，因比重大，应沉到瓶底，而脂肪则浮起。

图3-2　低倍镜下的肾小球

二、现场处理（即刻处理）

如何对所切割下来的肾脏组织进行分配，应视具体情况具体分析，既不能千篇一律，也不能没有原则。一般讲，荧光有3～5个肾小球、电镜1～2个肾小球，光镜越多越好，但最好不能少于10个，而且尽量包含皮髓交界处的肾组织和少量髓质。据统计，标本含5个肾小球时，诊断准确率为65%，而含15个肾小球时，则提高到95%。如果穿刺次数较多或患者肾功能不好不能多次穿刺时，可不留荧光标本，而改用石蜡切片做免疫荧光。所使用的组织镊，一旦接触到固定液，一定要用盐水冲洗一下才能连续使用。常见切割方法见表3-2。

表3-2　几种标本的切割方法

注：免疫荧光电镜光镜

（一）光镜标本的处理

以10%的福尔马林（甲醛）缓冲溶液固定。方法是用洗净的玻璃安瓶（如青霉素安瓶）倒入3ml固定液，室温或4℃保存。如免疫荧光无球或因设备所限不做免疫荧光，也可用此标本做免疫组化，但抗原破坏严重。由于它的pH为中性，不会产生福尔马林色素，组织在此固定液中长时间放置也不会使组织变硬，同时福尔马林具有穿透力强、固定均匀、可以保存组织内的脂类物质，使组织很少收缩，增加柔韧性，有利于切片。标本的固定时间要超过4小时（见表3-3）。

表3-3　三镜检查的标本固定和保存方法

（二）免疫荧光标本的处理

湿盐水纱布保存。方法是将3～4层的纱布置于安瓶的瓶底，倒入少许盐水，浸透纱布，然后将安瓶倒置，控净瓶底多余盐水即可。如果盐水太多，肾组织浸在其中容易造成自溶，如果盐水太少组织干涸，影响抗原性。标本可在4℃时短时间保存或冰冻下较长时间保存。但最好在24小时内完成。

（三）电镜标本的处理

以2%～3%的戊二醛溶液固定。方法是用洗净的青霉素安瓶倒入3ml固定液，室温或4℃保存。