巨噬细胞的吞噬功能

第一节　巨噬细胞的吞噬功能

高等动物体内的巨噬细胞、单核细胞和嗜中性粒细胞，具有吞噬的功能。它们广泛分布在组织和血液中，在机体的非特异免疫功能中起着重要的作用。当病原微生物或其他异物侵入机体时，能招引巨噬细胞，而巨噬细胞又具有趋化性，它通过产生活跃的变形运动，主动向病原体和异物移行聚集，首先把异物吸附在细胞表面，随之，吸附区域的细胞膜向内凹陷，伸出伪足包围异物，并吞入胞质，形成吞噬泡，继而在细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡融合，形成吞噬溶酶体，把病原体杀死，异物消化分解。

一、所需试剂及设备

显微镜、高压灭菌锅、解剖盘、解剖剪、1ml注射器、吸管、载玻片、盖玻片；小鼠（体重20g左右），鸡血；6%淀粉肉汤（含0．3%台盼蓝）。

二、操作步骤

1．实验前2天，每天给小白鼠腹腔注射6%淀粉肉汤（含台盼蓝）1ml。

2．实验时，再往腹腔内注射1ml 1%鸡红细胞悬液，并轻揉腹部，使鸡红细胞悬液分散。

3．20～30min后，用脊椎脱臼法处死小鼠（右手抓住鼠尾，用力向后拉，左手拇指与食指同时按住鼠头，使脊髓与脑髓间断开致死）。

4．迅速剖开腹腔，用未装针头的注射器或吸管吸取腹腔液。

5．取一张干净的载玻片，滴一滴腹腔液，盖上盖玻片，显微镜下检查。

观察时，将视野光线调暗。在高倍镜下，先分辨清鸡红细胞和巨噬细胞。鸡红细胞为淡黄色、椭圆形、有核的细胞。而数量较多、体积较大圆形或不规则的细胞，其表面有许多似毛刺状的小突起（伪足），胞质中有数量不等的蓝色颗粒（为吞入的含台盼蓝淀粉肉汤形成的吞噬泡）即为巨噬细胞。变换视野，仔细观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程。可见有的鸡红细胞（一至多个）紧贴附于巨噬细胞的表面；有的巨噬细胞已将一至数个红细胞部分吞入；有的巨噬细胞已吞入1个或几个红细胞在胞质中刚刚形成椭圆形的吞噬泡；有的巨噬细胞内的吞噬泡体积缩小，并呈现圆形，这是与初级溶酶体发生融合，泡内物正在被消化分解。

6．绘图示出所观察到的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的各种形态。

7．计算吞噬百分比，即每100个吞噬细胞中吞有鸡红细胞的吞噬细胞数。

三、注意事项

1．小鼠腹腔注射时注意不要刺伤内脏。

2．腹腔内的细胞浓度过大，可用生理盐水稀释。