【摘要】：2．掌握血清总蛋白测定方法，及721分光光度计或半自动生化多用仪的使用方法和现代生化检测试剂盒的应用。
实验十四 血清总蛋白测定（双缩脲法）
一、实验目的与要求
1．了解血清总蛋白测定在人体营养学上的意义及其生理学上的重要性。
2．掌握血清总蛋白测定方法，及721分光光度计或半自动生化多用仪的使用方法和现代生化检测试剂盒的应用。
二、实验原理
在碱性条件下，蛋白质多肽链中的肽键与铜离子络合形成紫红色化合物。
三、实验试剂与仪器
1．本实验所用仪器
（1）AT－648半自动生化分析仪1台；
（2）振动摇床1台；
（3）烧杯2个。
2．分组及仪器 2人一组，每组仪器包括：
（1）10μl微量加样器1个；
（2）1ml移液管1个；
（3）洗耳球1个；
（4）2ml试管3个；
（5）搪瓷盘1个；
（6）微量加样滴头；
（7）吸水纸。
3．试剂主要成分
（1）氢氧化钠0．6mol／L；
（2）酒石酸钾钠32mmol／L；
（3）碘化钾20mmol／L；
（4）硫酸铜12mmol／L；
（5）总蛋白校准液70．0g／L（7．00g／dl）。
四、实验方法与步骤
1．按下表在试管中加入各溶液：
表14－1 系列反应管中所加溶液的量
2．混合，置37℃水浴保温10min。
3．于波长546nm以试剂空白校零，读取各管吸光度（A）。
五、实验结果与分析
六、实验报告
参照《营养学》、《生物化学》原理分析。
七、注意事项
1．试剂为空白对照；
2．每组样品做2～3个平行；
3．正常参考范围：60～80g／L。
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