【摘要】:玻片凝集实验是一种简便、快捷的检测方法,即抗原与抗体的反应在玻片上进行,是一种定性的实验,既可检测抗原,也可检测抗体。在有适当电解质存在的情况下,若诊断血清与未知细菌发生特异性结合,形成肉眼可见的凝集物,即为阳性;若不发生特异性结合,无凝集物出现,则为阴性。接种环在取每种诊断血清前、后均需严格灭菌,以免出现假阳性;在分别取待检菌混合于各诊断血清前、后也需严格灭菌接种环。
实验一 细菌的玻片凝集实验
玻片凝集实验是一种简便、快捷的检测方法,即抗原与抗体的反应在玻片上进行,是一种定性的实验,既可检测抗原,也可检测抗体。适用于血型鉴定及微生物的菌种鉴定及分型等。
实验目的
(1)掌握玻片凝集法菌种鉴定的原理及操作方法。
(2)了解玻片凝集实验的结果判定。
实验原理
用已知的标准诊断血清鉴定未知的细菌。在有适当电解质存在的情况下,若诊断血清与未知细菌发生特异性结合,形成肉眼可见的凝集物,即为阳性;若不发生特异性结合,无凝集物出现,则为阴性。
实验材料
(1)伤寒沙门菌诊断血清、痢疾志贺菌诊断血清、无菌生理盐水。
(2)待检菌斜面培养物。
(3)载玻片、接种环、酒精灯、记号笔等。
实验方法
(1)用记号笔在干净的载玻片上划两条直线,将其均分为三格,并标明1、2、3。
(2)按无菌操作方法取伤寒沙门菌诊断血清加入第1格内,用同样的方法取痢疾志贺菌诊断血清加入第2格内,第3格内加入无菌生理盐水。
(3)按无菌操作方法取待检菌斜面培养物少许加入第1格内,混匀。用同样的方法分别取待检菌加入第2格和第3格内,混匀。
(4)轻轻摇动玻片,在1~2min内观察凝集现象,记录结果。观察完毕后,将玻片放入盛有消毒液的容器内。
实验结果
出现肉眼可见的均匀一致的凝集颗粒者为阳性,仍为乳浊液者为阴性。
注意事项
接种环在取每种诊断血清前、后均需严格灭菌,以免出现假阳性;在分别取待检菌混合于各诊断血清前、后也需严格灭菌接种环。
思考题
简述玻片凝集实验的原理、特点及用途。
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