【摘要】:所用载体若为聚苯乙烯等胶乳颗粒,则称为间接胶乳凝集实验。类风湿因子是一种出现在类风湿患者血清中的抗人变性IgG的抗体,以IgM为主,此种抗体可与IgG的Fc段特异结合。若以变性IgG致敏胶乳颗粒,与患者血清中类风湿因子相遇,即可出现凝集现象。5min内出现均匀的乳白色凝集颗粒者为阳性,无凝集者为阴性。必要时阳性标本可进一步稀释,以测定RF的滴度。
实验四 类风湿因子免疫胶乳实验
间接凝集实验需将可溶性抗原或抗体吸附或偶联在一种与免疫反应无关的载体颗粒上,再与相应抗体或抗原结合出现凝集现象。所用载体若为聚苯乙烯等胶乳颗粒,则称为间接胶乳凝集实验。
实验目的
(1)掌握间接胶乳凝集实验的基本原理、用途。
(2)了解类风湿因子检测的意义,以及类风湿因子检测的操作方法。
实验原理
类风湿因子(RF)是一种出现在类风湿患者血清中的抗人变性IgG的抗体,以IgM为主,此种抗体可与IgG的Fc段特异结合。若以变性IgG致敏胶乳颗粒,与患者血清中类风湿因子相遇,即可出现凝集现象。
实验材料
(1)经56℃30min灭活的待检血清。
(2)类风湿免疫诊断试剂(人变性IgG致敏的胶乳颗粒),阳性对照血清、阴性对照血清。
(3)生理盐水、玻璃板、吸管等。
实验方法
(1)用生理盐水将待检血清按照1∶20稀释。
(2)分别滴加1∶20稀释的待检血清、阳性对照血清、阴性对照血清各1滴于玻璃板上3个方格内,然后每个方格内各滴加胶乳试剂1滴,立即摇动玻璃板将二者混匀。
实验结果
5min内出现均匀的乳白色凝集颗粒者为阳性,无凝集者为阴性。必要时阳性标本可进一步稀释,以测定RF的滴度。
注意事项
应在5min内观察结果,放置过久可出现假阳性。
思考题
间接凝集实验和直接凝集实验有何区别?
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