【摘要】:荧光免疫技术是将抗原抗体反应的特异性与荧光技术的敏感性相结合,对抗原或抗体进行定性、定位或定量检测。荧光抗体技术间接法也称间接免疫荧光法,该方法是以特异性抗体为第一抗体,以荧光素标记的抗抗体为第二抗体,用于组织细胞抗原或自身抗体的检测。
第二节 免疫荧光技术
荧光免疫技术是将抗原抗体反应的特异性与荧光技术的敏感性相结合,对抗原或抗体进行定性、定位或定量检测。该技术分为荧光抗体技术(fluorescence antibody technique,FAT)、荧光免疫测定(fluorescence immunoassay,FIA)和流式细胞分析技术(flow cytometry,FCM)三大类。
荧光物质(荧光素)是一类能吸收激发光的光能而发射荧光的物质。常用的荧光素有异硫氰酸荧光素(FITC)、四乙基罗丹明(RB200)、藻红蛋白(PE)等。
荧光抗体技术(FAT)也称荧光免疫组织化学技术,是以荧光素标记抗体(简称荧光抗体),与切片中组织细胞中的抗原反应,洗涤后在荧光显微镜下观察呈现特异性荧光的抗原抗体复合物,借此对组织细胞中的抗原或抗体进行定位、定性或半定量(效价/滴度)检测。根据染色方法的不同可将荧光抗体技术分为不同的实验类型,主要有直接法、间接法、双标记法等。
荧光抗体技术间接法也称间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence,IIF),该方法是以特异性抗体(或待测抗体)为第一抗体,以荧光素标记的抗抗体为第二抗体,用于组织细胞抗原或自身抗体的检测。
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