例1 Balb/c小鼠SLE模型的建立
实验选题
系统性红斑狼疮（systemic erythematosus lupus，SLE）是一种自身免疫性疾病，在我国约有100万该病患者，病变累及多系统、多器官，病程反复迁延，大多成为终身疾病，严重影响人类的身体健康和心理健康。SLE以血清中出现抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）和组蛋白抗体（antihistone antibody，AHA）等多种自身抗体为特征。采用免疫荧光或电镜等复杂技术进行病理检查后发现，几乎100%的患者累及肾脏，形成狼疮性肾炎（lupus nephritis，LN），预后不良。SLE的发生与遗传背景、女性激素、环境影响等多种因素有关，至今病因不清，临床表现多样，诊治比较困难。所以，积极探讨SLE发病机制甚为必要。动物模型是研究SLE的发病机制、诊断、治疗的必要工具。现在应用的红斑狼疮模型鼠主要有两类，一类是自发形成SLE，另一类是人工诱导形成。前者发病时间长、病理损害不均一，价格昂贵。后者发病时间短，容易控制，临床表现一致性较高。所以，采用人工诱导的Balb/c小鼠SLE模型是研究SLE发生发展的最佳工具之一。
实验设计
（1）制备ConA活化的同系脾细胞诱导的SLE小鼠模型。
（2）SLE小鼠模型的鉴定。
实验实施
（1）目的：建立SLE小鼠模型。
（2）实验动物：清洁级Balb/c小鼠，雌性，7～8周龄，体重20±2g。
（3）主要试剂及仪器如下。
①主要试剂：ConA、RPMI 1640培养液、红细胞裂解液、FITC－goat－anti－mouse IgG、3%戊二醛磷酸缓冲液（pH值为7．4）、抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）和抗组蛋白抗体（antihistone antibody，AHA）（H2A－H2B）ELISA试剂盒。
②主要仪器：倒置显微镜、荧光显微镜、离心机、CO2培养箱、生物安全柜、电子分析天平、自动化板式酶标仪、透射电镜、病理切片机、冷冻切片机。
（4）步骤。
①制备ConA活化的同系脾细胞。
②动物分组并进行模型诱导。
③SLE模型鼠的鉴定。
A．SLE模型鼠外周血中ANA、AHA的测定：采用ELISA法检测，按试剂盒说明书进行。
B．SLE模型鼠肾脏病理改变的观察：①用光学显微镜观察肾脏形态学的变化；②用荧光显微镜观察肾脏IgG类IC的沉积；③用电子显微镜观察肾脏超微结构的改变。
思考题
（1）活化的同系脾细胞为什么能够诱导自身抗体的产生，进而发生系统性红斑狼疮？
（2）还有哪些方法可以人工诱导制备小鼠系统性红斑狼疮模型？
（唐小云）
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