人体寄生虫实验

实验五　人体寄生虫实验

实验目的

1．了解蛔虫、钩虫、蛲虫、血吸虫、猪带绦虫成虫的形态特征。

2．熟悉蛔虫卵、钩虫卵、蛲虫卵、血吸虫卵、带绦虫卵、阴道毛滴虫滋养体、间日疟原虫红细胞内期各期形态的特征。

3．了解猪囊尾蚴的形态特征及猪囊尾蚴感染猪的病理特征。

4．了解血吸虫尾蚴、中间宿主（钉螺）的形态特征及虫卵引起肝脏病变的病理特征。

5．掌握粪便直接涂片法、饱和盐水浮聚法、肛门拭子法的操作方法。

实验内容和方法

一、标本观察

1．蛔虫（示教）

（1）成虫大体标本：观察成虫的大小、形态、颜色，注意雌、雄虫的区别。

（2）蛔虫卵玻片标本：观察虫卵的形状、大小、颜色、卵壳厚薄、蛋白质膜的颜色、厚薄、卵内容物及其卵细胞与卵壳的关系。注意受精蛔虫卵与未受精蛔虫卵的区别。

2．钩虫（示教）

（1）成虫大体标本：观察两种钩虫的大小，体态，雌、雄虫的区别。

（2）钩虫卵玻片标本：观察虫卵的形状、大小、卵壳及卵内容物，特别注意卵壳薄而透明，与卵细胞间有明显间隙的特点。

3．蛲虫（示教）

（1）成虫大体标本：观察其大小，形态及雌、雄虫的区别。

（2）蛲虫卵玻片标本：观察其大小、形状（一侧扁平、一侧凸起）、卵壳厚薄及卵内容物（一条幼虫）的特点。

4．血吸虫（示教）

（1）成虫大体标本：肉眼观察成虫的固定标本，注意虫体的形态、大小、颜色、雌、雄合抱状态及雌、雄虫的区别。

（2）血吸虫尾蚴玻片标本：低倍镜下观察尾蚴的形态及尾部分叉的特征。

（3）血吸虫卵玻片标本：低倍镜下观察血吸虫卵的形状、大小，注意卵壳周围有无黏附的污物、卵的侧棘及卵内毛蚴。

（4）中间宿主：注意观察钉螺的形态、大小、颜色及表面结构。

（5）病理标本：观察肝脏虫卵结节。

5．猪带绦虫（示教）

（1）成虫大体标本：观察猪带绦虫的长度、节片数、节片厚薄、头节形态、链体中节片的特征。

（2）带绦虫卵玻片标本：低倍镜下观察带绦虫卵，注意其形态、大小、颜色，再换高倍镜观察其胚膜及其放射状条纹、卵内六钩蚴的形态特征。

（3）囊尾蚴大体标本及玻片标本：肉眼观察囊尾蚴的形状、大小、颜色及充满囊液特征；低倍镜下观察猪囊尾蚴头节形态。

（4）囊尾蚴感染猪的大体病理标本：观察被囊尾蚴寄生的猪肉（米猪肉）标本。

6．阴道滴虫（示教）　阴道滴虫玻片标本：注意观察滋养体的形态、大小、波动膜、鞭毛（4根前鞭毛与1根后鞭毛）、核和轴柱的结构特点。

7．疟原虫（示教）　间日疟原虫薄血膜玻片标本（瑞氏或姬氏染色）：在高倍镜下选择红细胞分布均匀的视野后滴加香柏油，继续在油镜下仔细寻找虫体，并注意观察以下内容：①早期滋养体（环状体）、晚期滋养体（大滋养体）、未成熟裂殖体、成熟裂殖体、雌、雄配子体的形态特征；②疟原虫的细胞核、细胞质及疟色素的染色性、形态、位置；③被寄生红细胞的变化，包括大小、着色、有无薛氏小点以及寄生的疟原虫数量。

二、常用诊断方法

1．粪便直接涂片法（操作）　本法适用于检查蠕虫卵，常连续涂片3次镜检可提高检出率。具体方法如下：

（1）于清洁玻片中央滴加生理盐水1～2滴。

（2）用竹签挑取少许新鲜粪便于生理盐水中涂匀，制成直径约1cm大小、厚薄以透过粪膜涂片刚可辨认纸上字迹为宜的圆形粪膜。

（3）先用低倍镜检查，必要时换高倍镜观察，但需加盖玻片，以免污染镜头。

2．饱和盐水浮聚法（操作）　利用饱和盐水的比重（1．17～1．18）大于某些虫卵比重的特点，使粪便中虫卵浮聚于饱和盐水液面，可达到集卵的目的，以提高检出率。本法适用于线虫卵检查，尤以检查钩虫卵效果最佳。具体方法如下：

（1）用竹签挑取黄豆大的粪便放入浮聚杯或青霉素小瓶内。

（2）加入少量饱和盐水搅匀，再慢慢加入饱和盐水至近瓶口处，用竹签挑出粗大粪渣弃去。

（3）改用滴管继续加饱和盐水至瓶口，以略高出瓶口又不溢出为宜，覆以载玻片。

（4）静置15分钟后，将载玻片迅速上提并翻转，直接镜检或上覆盖玻片镜检。

3．肛门拭子法（示教）　本法适用于检查蛲虫卵及牛带绦虫卵。具体操作方法有两种：透明胶纸法和棉签拭子法。现将透明胶纸法介绍如下：①把透明胶纸剪成3～5cm的长条，粘贴于载玻片上备用；②检查时，将胶纸掀起，将胶面粘贴于受检者肛门周围皮肤，使胶纸与受检者皮肤充分接触，并注意勿污染手指；③将胶纸贴于原载玻片上镜检。镜检时，可在胶纸与载玻片之间滴加二甲苯1滴，使胶纸平展，便于观察。

4．血液检查疟原虫（示教）　为便于诊断，实际检查过程中，多将厚、薄血膜制于同一载玻片上。

（1）薄血膜法：此法的优点是血膜中疟原虫形态典型，便于观察，但感染程度较轻时易漏检。具体操作方法是：①取洁净玻片2张，一张作涂片用，另一张作推片用；②将被检查者耳垂或指尖消毒后采血，第一滴血用消毒棉球擦去；③在玻片的1／3与2／3交界处蘸血1小滴，将推片的一端置于血滴之前，待血液与推片端缘接触并展开后，保持推片与载玻片呈30°～45°夹角由右向左迅速而均匀地推出，制成舌形薄血膜。

（2）厚血膜法：此法的优点是因血膜厚、血量多、疟原虫较集中，易于检出。但因红细胞重叠或被溶解，难以辨认疟原虫形态以及虫体与被寄生红细胞间的关系。具体操作方法是：用推片的一角取血1大滴，置同一载玻片的另一端（右）1／3的中间处，迅速由里向外涂成直径约1cm的厚血膜。

上述厚、薄血片制好后，待血片晾干，厚血膜用蒸馏水溶血，再行瑞氏或姬氏染色，清水冲洗，晾干镜检。

实验报告

1．绘出蛔虫受精卵、钩虫卵、蛲虫卵、血吸虫卵、带绦虫卵的镜下形态。

2．绘出阴道毛滴虫的镜下形态。

3．简述粪便直接涂片法和饱和盐水浮聚法的操作步骤。

（高　义）