实验十三 影响尿生成的因素
实验目的
通过观察若干因素对家兔尿生成过程的影响,加深理解影响尿生成的因素及影响机制。
实验对象
家兔。
实验原理
尿生成的过程包括肾小球滤过、肾小管和集合管的重吸收及分泌作用,凡能影响这三个环节的因素,都能引起尿的质和量发生变化。
实验用品
哺乳动物手术器材、二道生理记录仪或记纹鼓、血压换能器或水银检压计、电磁标、记滴器、电刺激器、保护电极、注射器、试管、试管夹、酒精灯、烧杯、纱布、线、膀胱插管(或细输尿管插管一对)、0.9%NaCl溶液、20%葡萄糖溶液、1.5%戊巴比妥钠溶液或20%氨基甲酸乙酯溶液、1∶10 000去甲肾上腺素溶液、抗利尿激素、呋噻米(速尿)、班氏试剂、3%柠檬酸钠溶液或肝素。
实验方法
1.麻醉和固定动物。
2.颈部手术和血压描记与“哺乳动物血压调节实验”相同,分离右侧迷走神经,穿线备用。
3.尿液收集可采用膀胱插管法或输尿管插管法。
(1)膀胱插管法:在耻骨联合上方,沿正中线作2~3cm的皮肤切口,沿腹白线剪开腹腔,将膀胱移出体外。在膀胱顶部做一个荷包缝合,在缝线中心作一小切口,插入膀胱插管,收紧缝线关闭其切口,膀胱插管通过橡皮管与记滴装置相连。
(2)输尿管插管法:在耻骨联合上方,沿正中线作4~5cm的皮肤切口,沿腹部白线剪开腹腔壁暴露膀胱,用手轻轻拉出并向下翻转膀胱,在其底部找到双侧输尿管,用线在双侧输尿管近膀胱处分别进行结扎。在结扎部位上方各剪一斜口,将两根充满生理盐水的细输尿管插管向肾的方向分别插入输尿管内,然后用线结扎固定。手术完毕,用38℃盐水纱布覆盖切口,将两根细插管并在一起与记滴装置相连。
观察项目
1.调试好记录装置,记录一段正常血压曲线和尿滴作为对照。
2.由耳缘静脉注入37℃的生理盐水20ml,观察血压和尿量的变化情况。
3.剪断右迷走神经,用保护电极以中等强度的电流反复刺激其外周端,让血压下降到50mmHg左右且维持30秒,观察尿量的变化情况。
4.静脉注射1∶10 000去甲肾上腺素0.5ml,观察血压和尿量的变化情况。
5.静脉注射抗利尿激素2U,观察血压和尿量的变化情况。
6.取尿液2滴,用班氏试剂作尿糖定性实验;再由耳缘静脉注入20%葡萄糖溶液5ml,观察尿量的变化情况。待尿量明显变化后再取尿液2滴作糖定性实验。
7.静脉注射呋塞米(5ml/kg),观察尿量的变化情况。
8.分离一侧股动脉,插入动脉插管进行放血,使血压迅速降到50mmHg左右,观察血压和尿量的变化情况。
9.从静脉迅速补充生理盐水20~30ml,观察血压和尿量的变化情况。
注意事项
1.因本实验项目多,损伤较大,需选用体质强壮的家兔。为保证实验中有足够的尿量,实验前给家兔多喂新鲜蔬菜。
2.手术操作应轻柔,避免出现损伤性尿闭。剪开腹膜时避免损伤内脏。输尿管插管一定要插入管腔内,不要误入管壁的肌层与黏膜之间。
3.本实验要做多次静脉注射,应注意保护耳缘静脉;静脉穿刺从耳尖开始,逐步移向耳根。
4.每进行一项实验,均应等待血压和尿量基本恢复到对照值后再进行。
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