显微镜的构造和使用

实验一　显微镜的构造和使用

【实验目的】

1.认识显微镜的构造，掌握显微镜的使用。

2.能在镜下辨认细胞。

【实验要点】

1.显微镜的构造。

2.观察切片的方法与步骤。

【实验器材】

1.显微镜。

2.复层扁平上皮切片(H.E染色)。

【实验方法和步骤】

一、演示

(一)显微镜的构造(图1－1)

1.机械部分

(1)镜座:显微镜的底座。

(2)镜臂:显微镜的支柱，为手持握的部位。镜座与镜臂连接处称倾斜关节，此关节在使用显微镜时可运动改变镜臂倾斜度。

(3)载物台:放置切片的平台。中间有一孔称通光孔。台面装有用来固定切片的玻片夹。载物台的侧面或上面有推进器螺旋，可使玻片夹作前后、左右方向的移动。

(4)镜筒:为镜臂前上方的空心圆筒，上装目镜，下装物镜旋转盘。

(5)聚焦调节螺旋:一般位于镜筒和镜臂之间，用于调节镜筒与载物台的距离，从而达到调焦的目的。通常有粗调螺旋和细调螺旋两组，分别完成较大幅度的调节和较精确的调节(前旋，镜头下降;后旋，镜头上升)。

(6)旋转盘:为安装在镜筒下端的圆形转盘，装有放大倍数不同的物镜。用于转换物镜，并使目镜、物镜和通光孔三点成一线。

2.光学部分

(1)目镜:装于镜筒上端，镜头上标有“5×”、“10×”等放大倍数。

(2)物镜:装于旋转盘下端，一般分为低倍镜(10×)、高倍镜(40×)和油镜(100×)3种镜头。

图1－1　显微镜的构造

(3)聚光器:装于载物台下面，用于聚光，增强视野的亮度。在聚光器右后侧装有聚光器升降螺旋，用于升降聚光器，调节视野的亮度。聚光器的底部装有光圈，通过开大或缩小，调控光线的进入量。

(4)反光镜:为装于聚光器下方的小圆镜，分平、凹两面。反光镜可全方位自由转动，以便将光线反射通过通光孔入物镜。强光下使用平面，弱光下使用凹面。

(二)显微镜的使用方法与步骤

1.取镜

取显微镜，须右手握住镜臂，左手托住镜座，将显微镜稳妥地轻置于距实验台边缘5～10cm处，并使镜臂朝向自己。

2.对光

(1)调整座椅高度于适当位置。落座后，倾斜镜臂，把显微镜调整到适宜观察的角度。

(2)运动旋转盘，将低倍物镜调至对应通光孔的位置，使之与目镜同在一条线上。

(3)用眼对准目镜，用手打开光圈，调节聚光器，转动反光镜，使目镜视野的亮度适宜、均匀。

3.低倍镜使用

(1)取备好的组织切片，先肉眼观片，随后正面朝上固定于载物台。

(2)运用推进器移动切片标本，使切片标本中央部位对准通光孔中央。

(3)用粗调螺旋将镜筒下移至距标本3～5mm处。先用目镜边观察边转动粗调螺旋，使镜筒缓慢提升。当视野中出现物像时，改用细调螺旋至物像清晰为止。

4.高倍镜使用

(1)先在低倍镜下找到需要放大观察的结构，并用推进器将其移至视野中央。

(2)改换高倍镜，同时调节细调螺旋至物像清晰为止。

5.油镜使用

(1)用高倍镜看清楚结构后，将该结构移至视野中央。

(2)上移高倍镜，并将高倍镜头移向一侧。

(3)在切片上滴加一滴香柏油，注意使油落于与通光孔相对的切片点位置。

(4)换油镜，用粗调螺旋将镜筒慢慢下移，注视至油镜头与香柏油接触。

(5)观察目镜，使用细调螺旋调节，直到镜下视野清晰为止。

(6)观察结束，将镜筒升高后，卸下油镜头，先用擦镜纸将油镜头上的油擦净，再更换干净的擦镜纸，蘸少许二甲苯，擦拭油镜和切片上残留的香柏油。最后更换干净的擦镜纸擦净。

6.注意事项

(1)看显微镜时，应两眼并用，左眼看镜下结构，右眼可观察资料或绘图。

(2)一般使用左手调焦，右手用于画图或其他操作。

(3)物镜下移时，尤其在使用高倍镜过程中，应注意防止压碎切片。

(4)显微镜使用结束后，应做到:玻片取下归还，物镜成外八字形位置，镜头下移至最低位置，反光镜呈垂直位置，用绸布将显微镜整体擦拭干净，返还原位。

二、观察

按要求，学生一人领取一台显微镜和一张切片，按照显微镜的使用方法演练操作。

1.低倍观察

细胞排列紧密，细胞质染成浅红色，细胞核染成蓝色，能分辨细胞和细胞的界限。

2.高倍观察

细胞膜不太清楚，核内可见不均匀的染色块，有的可见核仁。细胞器一般看不到。

三、回顾与思考

1.显微镜的使用方法。

2.绘图:用红蓝铅笔绘制高倍镜下的细胞图，注明细胞质、细胞核。