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植物病原壶菌、接合菌的识别与鉴定

时间:2023-09-25 理论教育 版权反馈
【摘要】:用挑针挑取受害病组织内呈黄褐色粉末状物制成临时玻片,或徒手切病斑,制临时玻片,或直接镜检玉蜀黍节壶菌的永久玻片,观察休眠孢子囊的颜色和形态特征。注意观察假根和孢囊梗的位置并与根霉属相比较。镜检笄霉的孢囊梗和孢子囊形态,注意观察该属与根霉属、毛霉属的区别。

一、目的要求

认识壶菌、接合菌真菌的一般形态及其所致植物病害的症状特点,了解异宗配合与同宗配合的含义及同型配子囊与异型配子囊的差别。

二、材料和用具

(一)实验材料

甘薯软腐病菌(Rhizopus stolonifer)、犁头霉(Absidia sp.)和毛霉(Mucor sp.)“+”“-”菌株的斜面培养物或平板培养物。

玉米褐斑病菌(Physoderma maydis)、马铃薯癌肿病菌(Synchytrium endobioticum)、甘薯软腐病菌(Rhizopus stolonifer)及病害标本。

PDA培养基。

(二)实验用具

灭菌培养皿、酒精灯、火柴、纱布、挑针、镊子、刀片、通草、载玻片、盖玻片、浮载剂、吸水纸、显微镜、擦镜纸等。

三、内容和方法

(一)壶菌纲(Chytridiomycetes)

1.节壶属(Physoderma)

观察由玉蜀黍节壶菌(P.maydis)为害玉米引起的褐斑病标本,注意观察受害部位的病斑颜色及特点。 用挑针挑取受害病组织内呈黄褐色粉末状物制成临时玻片,或徒手切病斑,制临时玻片,或直接镜检玉蜀黍节壶菌的永久玻片,观察休眠孢子囊的颜色和形态特征。

2.集壶菌属(Synchytrium)

观察内生集壶菌(S.endobioticum)为害马铃薯引起的马铃薯癌肿病标本,注意观察受害部位病斑形状、颜色等特点。 用挑针挑取受害病组织内呈黄褐色粉末状物制成临时玻片,或直接镜检内生集壶菌的永久玻片,观察休眠孢子囊堆的形态特征。

(二)接合菌纲(Zygomycetes)

1.根霉属(Rhizopus)

观察甘薯软腐病症状特征。用挑针挑取霉层制片、镜检,观察孢子囊、孢囊孢子、孢囊梗、囊轴、假根及其匍匐枝的形态。

2.毛霉属(Mucor)

挑取平板培养的毛霉培养物制作临时玻片,镜检观察菌丝、孢子囊、孢囊孢子、孢囊梗的形态特征。

3.犁头霉属(Absidia)

挑取平板培养的犁头霉培养物制作临时玻片,镜检观察菌丝、孢子囊、孢囊孢子、孢囊梗、假根及其匍匐枝的形态特征。 注意观察假根和孢囊梗的位置并与根霉属相比较。

4.笄霉属(Choanephora)

形成大小两种类型的孢子囊,一般在条件不适时,产生大型孢子囊,大型孢子囊产生在顶端弯曲的孢囊梗上,其内产生大量孢囊孢子,孢子顶端有数根细毛。 通常形成小型孢子囊,小型孢子囊着生在孢囊梗顶端膨体上产生的许多小枝末端形成的膨大囊状体表面突起的小梗上。 该菌为害花和果实,引起花腐和果腐。 镜检笄霉的孢囊梗和孢子囊形态,注意观察该属与根霉属、毛霉属的区别。

(三)异宗配合现象与接合孢子

1.异宗配合现象的观察

取具有“+”“-”性征分化并有亲和性的根霉、毛霉或犁头霉的2个菌株,分别对峙培养接种,每种菌接种3块平板,在平板底部写上所接种的菌株编号、接种日期,在25℃温箱中培养1周,观察异宗配合现象,并记录哪个培养皿中形成了接合孢子。

2.接合孢子的观察

从产生接合孢子平板中间的接合线上挑取培养物制作临时玻片,观察原配子囊、配囊柄及配子囊的发育过程,注意观察配囊柄的形状及大小。

四、实验学时

2~3学时。

五、作业与思考题

1.绘制接合孢子形态图。

2.绘制匍枝根霉孢子囊、孢囊梗、孢囊孢子、假根、匍匐枝图。

3.何谓同宗配合、异宗配合?你所配对培养的平板中哪种配对组合产生了接合孢子,原因是什么?

4.何谓同型配子囊、异型配子囊?

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