一、目的要求
植物病害标本同其他生物标本一样，是生物性状和分布的记载，植物病害标本也是症状最好的描述，在科研、教学、科学普及及植物保护工作中都十分有用。 本实习主要通过采集和制作标本，了解植物病害标本采集要求，学会标本采集与记录，掌握植物病害标本的制作和保存方法。
二、材料和用具
（一）实验材料
田间各种病害标本。
（二）实验用具（药品）
标本夹、标本箱、刀、剪、锄、小玻瓶、标本纸、纸袋、标本签、记录本、塑料袋、95%的酒精、硫酸铜、亚硫酸铜、甲醛溶液、蒸馏水、记号笔等。
三、内容和方法
（一）病害标本的采集
采集时应注意以下事项。
1.结合多种因素综合考虑
要将采集地的地理生态条件与病害发生条件、病原物的生物特性综合起来考虑。 如采集卵菌应在潮湿低洼的地区或易积水结露的部位寻找；寄生性种子植物应与寄主相联系。 如列当在高纬度地区双子叶草本植物上寄生，独脚金在低纬度地区单子叶植物上寄生。
2.标本要求症状典型
完整病害标本主要包括有病的根、茎、叶和果实等，好的标本要有各受害部位在不同时期的典型症状，真菌病害标本上最好要有子实体。 如柑橘炭疽病，叶片症状有叶斑型和叶枯型，果实症状有干腐型和湿腐型，还有枝梢上的枝枯型等。
3.标本要求一定数量
每种标本采集的件数不能太少，一般同类标本要有5~10个重复，因为在制作和鉴定过程中常有损坏，多余的标本还可以用于交流。
4.要做必要的记录
记录主要内容包括寄主名称、病害名称、采集日期和地点、采集人姓名、主要发生情况和必要的生态因子。
（二）病害标本的制作
从野外采回的标本，除一部分用作分离鉴定外，对于典型的病害症状最好是先摄影，再压制或浸渍保存。 压制或浸渍保存的标本尽可能保持其原有性状，微小的标本可以制成玻片，如双层玻片，凹穴玻片或用其他小玻管、小袋收藏。
1.标本干燥制作法
此方法比较简单且经济，标本可以长期保存，所以应用最广。 茎和叶可压在吸水的标本纸中，用标本夹夹紧，日晒任其干燥。 不准备做分离的标本，可在50℃的烘箱中放2~3d，使其很快干燥。标本干燥愈快，愈能保持原有的色泽。 夏季的温度和湿度高，标本容易发霉和变色，标本纸的更换要勤，通常前3~4d每天换纸1~2次，以后每2~3d换1次，至完全干燥为止。 春、秋两季则可减少换纸次数。 每次换纸时将标本加以整理，经过初步干燥后，标本变软而容易铺展。 为了加快干燥，有些标本可用熨斗或微波炉干燥，使其快速干燥而保持原来的色泽。 干燥的标本可装于玻盒、纸袋内，也可塑封保存。
2.浸渍标本制作法
此方法占地面积大，保存时间又有限，所以很少用于保存大量的标本。浸渍法多半用于保存教学和示范用的标本，适用于果实和其他含水量多的材料。 浸渍液种类很多，有纯属防腐性的，也有专为保持标本原来色泽的。
（1）普通防腐性浸渍液
福尔马林50m L，95%的酒精300m L，加水至2000m L。
（2）保存绿色标本浸渍液
①醋酸铜浸渍液
以结晶醋酸铜逐渐加到50%的醋酸中，至饱和为止，将配成的原液用水稀释3~4倍。将稀释后的溶液加热至沸腾，投入标本，标本的绿色最初会被漂去，经3~4min，至绿色恢复后，将标本取出，用清水漂净，保存于5%的福尔马林中，或压制成干标本亦可。
②硫酸铜及亚硫酸浸渍法
标本在5%的硫酸铜溶液中浸泡6~24h，取出后用清水漂洗数小时，然后保存于亚硫酸中（用45m L含5%~6%二氧化硫的亚硫酸溶液加水1000m L配成），亚硫酸浸渍液亦可用以下方法配成：取无水亚硫酸钠16g，溶于1000m L水中，取浓硫酸20m L徐徐滴入上述溶液中，配成的溶液在密封条件下可以贮藏。 本法用于保持绿色叶片及果实等，颜色比醋酸铜法自然，但应注意密封瓶口，或每年更换一次亚硫酸浸渍液。
（3）保存黄色和橘红色标本浸渍液
含有叶黄素和胡萝卜素的果实，如杏、红辣椒等用亚硫酸保存。 用市售含5%~6%二氧化硫的亚硫酸按4%~10%再稀释成稀溶液使用。 对各种标本的适宜浓度要通过实验才能找出。 亚硫酸过浓，有漂白作用，不能保色，亚硫酸过稀防腐能力不足。 在需用较低浓度时，可加少量酒精增加防腐能力。 溶液中加甘油少许，可以防止标本开裂。
（4）保存红色标本浸渍液
标本的红色是由花青素形成的，花青素能溶于水和酒精，因此，保存标本的红色是比较困难的。保存红色常用的浸渍液有下列3种，以瓦查浸渍液较好。
①赫斯娄浸渍液
氯化锌50g，福尔马林25m L，甘油25m L，加水至1000m L。
溶氯化锌于热水中，加入福尔马林及甘油，如有沉淀，用其清液。
②波尔浸渍液
以二氧化硫通过福尔马林至饱和为止，稀释20~40倍使用。
③瓦查浸渍液
硝酸亚钴15g，氯化锡10g，福尔马林25m L，加水至2000m L。
此溶液可用于保存草莓、辣椒以及其他组织的红色，标本洗净后在此溶液中浸泡14d，然后保存于下列浸渍液中。
福尔马林10m L，95%的酒精10m L，亚硫酸（饱和溶液）30~50m L，加水至1000m L。
3.标本瓶瓶口封口法
（1）暂时封口法
以蜂蜡及松香各1份，分别熔化混合，加入少量的凡士林调成胶状物，涂于瓶盖边缘，将盖压紧。亦可用明胶4份在水中浸数小时，将水滤去，加热熔化，拌入1份石蜡，熔化混合后成为胶状物，趁热使用。
（2）永久封口法
以酪胶及消石灰各1份混合，加水调成糊状物，用于封盖，干燥后，由于酪酸钙的硬化而密封。亦可用明胶28g在水中浸数小时，将水滤去加热熔化，混入0.324g的重铬酸钾及充分的熟石膏使成糊状，即可用于封口。
（三）标本的整理、排列和保藏
制成的标本，经过整理和登记，然后以一定的系统排列和保藏。
1.标本盒保藏
教学和示范的病害标本，除浸渍标本外，用玻面的标本盒保藏比较方便。玻面标本盒大小不一，适宜的大小是200mm×280mm×（15~30）mm。标本盒中先铺一层棉花，棉花上放标本和标签，注明寄主植物和寄生菌的名称，然后加玻盖。 棉花中可加少许樟脑粉或其他药剂驱虫。
2.蜡叶标本纸保藏
取重磅道林纸，按不同方式折成纸套，纸套大小根据标本的大小决定。标本装在纸套中，纸套上写明鉴定记录，或将鉴定记录的标签贴在纸套上。
3.塑封保藏
将标本平整夹于塑料内，通过塑封机加热排净空气并密封。
4.标本瓶保藏
浸渍的标本放在标本瓶内保藏，为防止标本下沉或上浮，可将标本绑在玻璃条上然后再放入标本瓶中。 盖好瓶口后滴加石蜡封口，然后贴上标签。
四、实习时间
3天。
五、作业与思考题
1.病害标本是否一定要压制或浸渍保存？
2.仁果、浆果病害标本应如何保存？
3.每人上交10份已鉴定好的标本。
附：植物病害标本采集和鉴定记录
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